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玉米籽粒离体培养方法

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玉米 籽粒 培养 方法
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1、除所述获得的9颗玉米籽粒中的8颗玉米籽粒及其穗轴, 保留所 述9颗玉米籽粒中央的1颗 籽粒及其穗轴,轴。 0018 上述玉米籽粒离体培养方法在另一种实施方式中, 在步骤(3)中, 所述 分粒为: 切 米样 块在与穗轴平行方向切出相邻3列籽粒并至少保留这3 列籽粒的部分穗轴, 获得9颗玉米籽 粒及其穗, 所述 分块为: 将 所述玉米果穗在与穗轴垂直的方向切出相邻三圈籽粒作为玉米样 块, 然后将所述玉的玉米果穗转至 超净工作台。 0017 上述玉米籽粒离体培养方法在另一种实施方式中, 在步骤(2)中在另一种实施方式中, 在步骤(1)中用75 的酒精将 剪去花丝的玉米果穗进行灭菌, 然后将所述灭菌后。

2、 大量元素母液、 微量元素母液、 有机母 液、 铁盐母液和碳源。 0016 上述玉米籽粒离体培养方法4)将所述通过分粒获得的玉米籽粒放入培养基进行培养; 0015 其中所述培养基的组分包括氨基酸母液、2)将所述灭菌后的玉米果穗分块获得玉米样块; 0013 (3)将所述玉米样块进行分粒; 0014 (7125131 A 4 0011 (1)将玉米果穗剥去苞叶, 剪去花丝, 用酒精灭菌; 0012 (目的, 本发明提供了一种玉米籽粒离体培养方法, 包括以下 步骤: 说明书 1/6 页 4 CN 10问题, 且能将籽粒培 养至成熟, 从而能够更 好地研究影响玉米籽粒发育的因素。 0010 为实现上述。

3、一种玉米籽粒离体培养方法, 从而避免在籽粒培 养过程 中出现染菌、 籽粒不能培养至成熟、 籽粒爆裂等暗示该信息构成已为本领域一般技术 人员所公知的现有技 术。 发明内容 0009 本发明的目的在于提供公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理 解, 而不 应当被视为承认或以任何形式素, 目前亟需一种新 的玉米籽 粒离体培养技术, 从而避免在籽粒培养过程中出现上述问题。 0008 籽粒不能培 养 至成熟、 籽粒爆裂等问题。 0007 因此, 为了更好地研究影响玉米籽粒生长发育的因y和Below提出的玉米籽粒 液体培养 技术。 但上述三种方法在玉米籽粒培养过程中很容易出现染菌、 。

4、果穗离体培养系统, 1981年Jones提出 的玉米籽粒固体培养技术, 1989年Singletar响。 现有的玉米籽 粒离体培养技术多集中在 1980s, 如1977年Gengenbach提出的玉米量操作。 而大田试验因受外界环境 因素影响较大, 无法深入研究某一胁迫或 营养物质对籽粒生长发育的影验。 由于玉米生育后期植 株高大, 人工气候室 往往因场地限制不能满足玉米的生长要求, 且无法大批 生物和非生物逆境, 营养元素及植物生长调节剂对玉米籽 粒生长 发育影响的研究多采用人工气候室和大田试 但在大田条件下, 营养元素 和植物生长调节剂对粒 重的增加也起着调控作用。 0006 目前针对以上。

5、和非生物逆境对玉米籽粒生长发育的影响, 在适宜的条件 下, 玉米 籽粒库容建成及充实主要受遗传控制,育后期的病害, 如 穗腐病、 瘤黑粉病, 也是 造成玉米产量下降的一大原因。 0005 除了上述生物灾害经常发生, 玉米生育期 内日照不足会直接影响营养生长、 碳氮代 谢及产量的形成; 此外, 玉米生了重要影响, 已成为我国玉米生产 的主要限制因子; 另外, 我国6-8月份华北、 黄淮海地区 连阴雨北等区域频繁地出现高温和干旱等极端性 气候, 且 高温和干旱持续时间增长, 对全国玉米产量和品质产生、 日照时数、 玉米病害、 本身的遗传因素以及营养元素等。 0004 近年来, 我国华北、 西北和东。

6、米花丝依附于果穗, 苞叶包裹在外 部。 玉米的生长受到诸多因素 的影响, 大致有温度、 湿度、 温差、 叶、 雄穗、 雌穗等。 其中, 雌穗是肉穗花序, 受 精结实发育成 果穗, 果穗中心有穗轴, 玉, 是重要的粮食作物和重要的饲料来源, 也是总产 量很高的粮食作物。 0003 玉米的器官有根、 茎粒培养领域。 具体涉及到一种玉米籽粒离体培养 方法。 背景技术 0002 玉米是一年生禾本科草本植物CN 107125131 A 3 一种玉米籽粒离体培养方法 技术领域 0001 本发明涉及作物栽培籽m-1.5cm, 所述培养皿中需要加入所述液体培 养基10-15mL。 权利要求书 2/2 页 3 。

7、撑物支撑的所述滤纸之上进行培养, 其中所述培养 皿的直径为6-10cm, 所述支撑物的高度为0.5c放入所述液体培养基中, 在所述支撑物上面覆盖滤纸, 然后将所述得 到的玉米籽粒的穗轴部分放在由所述支根据权利要求8所述的玉米籽粒离体培养方法, 其特征在于, 在培养皿中加入所述 液体培养基, 将支撑物培养方法, 其特征在于, 将所述得到的玉米籽粒 的穗轴部分向下插入所述固体培养基中进行培养。 10.锅, 110-130灭菌 15-25分钟获得所述液体体培养基。 9.根据权利要求7所述的玉米籽粒离体50mL的锥形瓶中, 其 中每个锥形瓶分装35-45mL, 将所述锥形瓶瓶口进行封口, 放入高压灭菌。

8、量瓶中, 用蒸 馏水定容至1L, 用HCl或NaOH调整pH值至5.7-5.8, 然后分装于容量为2所述铁盐母液3- 6mL和所述碳源130-160g, 搅拌溶解得到混合溶液, 将所述混合溶液加入到容 所述 大量元素母液80-120mL、 所述微量元素母液8-12mL、 所述有机母液8-12mL、 制备: 在容量为2L的烧杯中倒入200-300mL蒸馏水, 然后加入所述氨基酸母液80-120mL、的玉米籽粒离体培养方法, 其特征在于, 所述培养基包括液体培 养基, 并且所述液体培养基通过如下步骤固体培养 基; 其中所述凝固剂包括琼脂, 并且所述琼脂的浓度为3-7g/L。 8.根据权利要求1所述。

9、45mL, 将 所述锥形瓶瓶口进行封口, 放入高压灭菌锅, 110-130灭菌15-25分钟获得所述沸腾, 直至所 述凝固剂完全融化, 然后分装于容量为250mL的锥形瓶中, 其中每个锥形瓶分装35-蒸 馏水定容至1L, 用HCl或NaOH调整pH值至5.7-5.8, 再加入5-6g凝固剂, 加热至3- 6mL和所述碳源130-160g, 搅拌溶解得到混合溶液, 将所述混合溶液加入到容量瓶中, 用元素母液80-120mL、 所述微量元素母液8-12mL、 所述有机母液8-12mL、 所述铁盐母液量为2L的烧杯中倒入200-300mL蒸馏水, 然后加入所述氨基酸母液80-120mL、 所述 大量。

10、所述固体培养基通过如下步骤制备: 权利要求书 1/2 页 2 CN 107125131 A 2 在容。 7.根据权利要求1所述的玉米籽粒离体培养方法, 其特征在于, 所述培养基包括固体培 养基, 并且g/L和FeSO47H2O20-35mg/L; 所述碳源中所包含的蔗 糖的浓度为130-170g/L6g/L和烟酸0.005-0.03g/L; 所述铁盐母液 中各组分的浓度为EDTA2Na30-45m/L; 所述有机母液中各组分的浓 度为盐酸硫胺素0.02-0.06g/L、 叶酸0.002-0.00g/L, CuSO45H2O0.001-0.004g/L和CoCl26H2O0.001-0.004g。

11、H2O0.1-0.4g/L, KI0.05-0.15g/L, NaMoO42H2O0.01-0.04的浓度分别为H3BO30.5-0.7g/L, MnSO4 H2O1.5-1.8g/L, ZnSO4726H2O2.5-3.5g/L和CaCl2 6H2O1.2-2.5g/L; 所述微量元素母液中各组分110mg/L; 所述大量元 素母液中各组分的浓度分别为KH2PO44.5-5.5g/L, MgCl0- 90mg/L、 半胱氨酸50-60mg/L、 天冬氨酸170-180mg/L和天冬酰胺102-30-35mg/L、 谷氨酰胺100-110mg/L、 苯丙氨酸130-140mg/L、 异亮氨酸8。

12、甘氨酸55-65mg/L、 缬氨酸105-125mg/L、 亮氨酸355- 365mg/L、 赖氨酸g/L、 精氨酸45-60mg/L、 色氨 酸65-80mg/L、 丝氨酸110-130mg/L、 5- 98mg/L、 组氨酸45-65mg/L、 苏氨酸65-75mg/L、 脯氨酸200-250m谷氨酸600-650mg/L、 蛋氨酸40-45mg/L、 丙氨酸150-180mg/L、 酪氨酸8.根据权利要求1所述的玉米籽粒离体培养方法, 其特征在于, 所述氨基酸母液中各组 分的浓度分别为: 硫胺素、 叶酸和烟酸; 所述铁盐母液包括EDTA2Na和FeSO47H2O; 所述碳源包括蔗糖。 6。

13、, KI, NaMoO42H2O, CuSO45H2O和CoCl26H2O; 所述有机母液包括 盐酸2O和CaCl26H2O; 所述微量元素母液包括H3BO3, MnSO4H2O, ZnSO47H2O 异亮氨酸、 半胱氨酸、 天冬氨酸和天冬酰胺; 所 述大量元素母液包括KH2PO4, MgCl26H酸、 精氨酸、 色氨酸、 丝氨酸、 甘氨酸、 缬 氨酸、 亮氨酸、 赖氨酸、 谷氨酰胺、 苯丙氨酸、 其特征在于, 所述氨基酸母液包括谷 氨酸、 蛋氨酸、 丙氨酸、 酪氨酸、 组氨酸、 苏氨酸、 脯氨穗轴进行部分切除, 得到连接有部分穗 轴的玉米籽粒。 5.根据权利要求1所述的玉米籽粒离体培养方法,。

14、8颗玉米籽粒及其穗轴, 保留9颗玉米籽粒中央的1颗 籽粒及其穗轴, 然后将所述保留的1颗籽粒所连接的米籽粒离体培养方法, 其特征在于, 在步骤(3)中, 所述分粒 为: 切除所述获得的9颗玉米籽粒中的邻3列籽粒并至少保留这3列籽粒的部分穗轴, 获得9颗玉 米籽粒及其穗轴。 4.根据权利要求3所述的玉玉米果穗在与穗轴垂直的方向切出相邻三圈籽粒作为玉米样块, 然后将所述玉 米样块在与穗轴平行方向切出相.根据权利要求1所述的玉米籽粒离体培养方法, 其特征在于, 在步骤(2)中, 所述分块 为: 将所述中用75的 酒精将所述剪去花丝的玉米果穗进行灭菌, 然后将所述灭菌后的玉米果穗转至超净工作 台。 3。

15、液、 铁 盐母液和碳源。 2.根据权利要求1所述的玉米籽粒离体培养方法, 其特征在于, 在步骤(1)粒放入培养基进行培养; 其中所述培养基的组分包括氨基酸母液、 大量元素母液、 微量元素母液、 有机母灭菌后的玉米果穗分块获得玉米样块; (3)将所述玉米样块进行分粒; (4)将所述通过分粒获得的玉米籽方法, 其特征在于包括以下步骤: (1)将玉米果穗剥去苞叶, 剪去花丝, 用酒精灭菌; (2)将所述107125131 A 2017.09.05 CN 107125131 A 1.一种玉米籽粒离体培养养至成熟, 从而能够更好地研究影响玉米籽粒发育的因素。 权利要求书2页 说明书6页 附图3页 CN 。

16、体培养方法避免 了在籽粒培养过程中出现染菌、 籽粒不能培养至 成熟、 籽粒爆裂等问题, 且能将籽粒培分包括氨基酸母 液、 大量元素母液、 微量元素母液、 有机母液、 铁 盐母液和碳源。 所述玉米籽粒离所述玉米样块进行分粒; (4)将所述通过分粒获得的玉米籽粒放入培养基 进行培养; 其中所述培养基的组穗剥去苞叶, 剪去花 丝, 用酒精灭菌; (2)将所述灭菌后的玉米果穗分 块获得玉米样块; (3)将粒离体培养方法 (57)摘要 本发明公开了一种玉米籽粒离体培养方法, 包括以下步骤: (1)将玉米果丽春田昕 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (54)发明名称 一种玉米籽赵丽晓宋庆芳陈冠英 (74)专利代理机构 北京中誉威圣知识产权代理 有限公司 11279 代理人 司中国农业大学 地址 100083 北京市海淀区圆明园西路2号 (72)发明人 王璞张萍黄收兵孟庆锋 (21)申请号 201710169977.X (22)申请日 2017.03.21 (71)申请人 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日。

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